Larutan garam adalah perkara biasa apabila kita bercakap tentang biologi selular atau biokimia. Terutamanya semasa eksperimen, larutan garam diperlukan. Dua larutan garam biasa ialah PBS dan HBSS. Terdapat bahan dan bahan kimia tertentu yang digunakan untuk mendapatkannya. Walaupun kedua-duanya diletakkan dalam piring Petri dengan sel, mereka masih mempunyai perbezaan.
PBS lwn HBSS
Perbezaan antara PBS dan HBSS ialah larutan garam PBS digunakan dalam biokimia dan eksperimen biologi molekul manakala HBSS digunakan dalam penyelidikan biologi keseluruhan. Walaupun kedua-duanya adalah masin dan membantu mengekalkan pH neutral, ia dibuat dengan bahan-bahan yang berbeza.
PBS adalah singkatan kepada Phosphate Buffered Saline. Ia adalah larutan garam penimbal berasaskan air yang membantu mengekalkan tahap pH yang malar dalam sampel. Tahap pH larutan ini adalah lebih kurang 7.4. PBS bersifat isotonik dan tidak toksik kepada kebanyakan sel.
HBSS bermaksud Penyelesaian Garam Seimbang Hank. Ia adalah larutan cecair atau serbuk yang digunakan untuk mengekalkan osmolaliti dan tahap pH dalam aplikasi biologi. Mereka juga bertanggungjawab untuk penyelenggaraan jangka pendek sel di luar medium pertumbuhan. HBSS terdiri daripada beberapa elektrolit yang terdapat dalam petak intrasel dan ekstrasel.
Jadual Perbandingan Antara PBS dan HBSS
| Parameter Perbandingan | PBS | HBSS |
| bermaksud | Salin Penimbal Fosfat | Penyelesaian Garam Seimbang Hank |
| bahan-bahan | NaCl, KCl, Na2HPO4, KH2PO4. | Garam tak organik, glukosa atau piruvat, fenol merah dan natrium bikarbonat. |
| Borang | Dibuat dalam bentuk cecair sahaja. | Boleh dibuat dalam bentuk cecair dan serbuk. |
| Suhu Penyimpanan | 15-30 darjah Celsius | 4-8 Darjah Celcius. |
| Aplikasi | mencuci sel, mengangkut tisu, mencairkan sel, dan menyediakan reagen. | Kultur Sel Mamalia, media pengangkutan |
Apakah PBS?
PBS adalah singkatan kepada Phosphate Buffered Saline. Ia adalah larutan garam penimbal berasaskan air yang membantu mengekalkan tahap pH yang malar dalam sampel. Paras air dan kepekatan ion larutan PBS sepadan dengan tubuh manusia yang bermaksud penyelesaian PBS bersifat isotonik.
Oleh kerana penyelesaian PBS tidak toksik kepada sel, ia mempunyai banyak aplikasi termasuk pencairan bahan dan menanggalkan sel bergumpal, dsb. Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, penyelesaian PBS telah mendapat permintaan tinggi kerana ia digunakan sebagai alternatif kepada medium pengangkutan virus untuk penyimpanan RNA virus termasuk SARS-CoV-2 atau Virus Corona.
Penyelesaian PBS boleh dibuat dengan pelbagai kaedah. Jika penimbal digunakan pada tisu hidup maka penyediaan memerlukan Pottasium Chloride atau Magnesium Chloride manakala jika penimbal digunakan pada tisu tetap maka Pottasium Chloride atau Magnesium Chloride tidak diperlukan. Semasa penyediaan, paras pH boleh diselaraskan menggunakan asid hidroklorik atau natrium hidroksida.
Bahan-bahan yang paling biasa bagi larutan PBS termasuk NaCl, KCl, Na2HPO4, dan KH2PO4 dalam jumlah yang dikira dengan tepat. Penyelesaian PBS juga boleh disediakan dengan menggunakan tablet atau kapsul penimbal PBS yang dibuat secara komersial. Larutan PBS disimpan sama ada pada suhu bilik atau di dalam peti sejuk.
Apakah HBSS?
HBSS bermaksud Penyelesaian Garam Seimbang Hank. Penyelesaian ini dinamakan sempena ahli biologi John H. Hanks yang merumuskannya pada tahun 1940. Penyelesaian ini digunakan sebagai sistem penampan dalam kultur sel dan membantu dalam mengekalkan tahap pH optimum atau pertumbuhan selular. Nilai pH optimum berkisar antara 7.0 hingga 7.4.
Oleh kerana larutan HBBS mengandungi glukosa dan natrium bikarbonat, ia digunakan untuk penyelenggaraan sel jangka pendek di luar medium pertumbuhan. Penyelesaian ini juga digunakan untuk pelbagai aplikasi kultur sel seperti mencuci sel, mengangkut sel, atau mencairkan sel. Larutan HBSS yang terbentuk dengan kalsium dan magnesium digunakan sebagai media pengangkutan atau untuk penyediaan reagen.
Penyelesaian HBSS disediakan daripada medium asas serbuk yang digabungkan dengan air tisu gred kultur. Ramuan biasa bagi larutan HBSS ialah garam tak organik, glukosa atau piruvat, fenol merah dan natrium bikarbonat. Selepas penyediaan, sampel larutan HBSS diuji untuk mengesahkan ketiadaan pencemaran bakteria atau kulat
Penyelesaian HBSS adalah halus dan dibekalkan dalam botol steril yang disinari gamma. Penyelesaian HBSS disimpan pada suhu rendah 4-8 darjah celsius dan jauh dari cahaya langsung. Ia juga lebih berbahaya untuk dibuat berbanding dengan penyelesaian PBS kerana sel manusia mempunyai bahan bio-berbahaya.
Perbezaan Utama Antara PBS dan HBSS
Kesimpulan
Kedua-dua PBS dan HBSS adalah larutan garam yang digunakan kebanyakannya dalam biologi molekul, eksperimen biokimia, dan untuk penyelidikan dalam ubat biologi. Semasa menjalankan eksperimen, kedua-dua larutan diletakkan di dalam cawan Petri dengan sel atau tisu. Penyelesaian itu memegang sel semasa memeriksa atau untuk digunakan semasa eksperimen. Walaupun kedua-duanya adalah larutan garam yang berasingan, ia juga boleh digunakan secara bergantian dalam keadaan yang menggalakkan. Walau bagaimanapun dalam kes sedemikian jika sampel diperlukan dalam bentuk serbuk, maka larutan HBSS dipilih kerana larutan PBS hanya dalam bentuk cecair.
PBS kebanyakannya lebih disukai untuk disediakan di makmal kerana komposisi bahan boleh diubah jika perlu dan ia juga selamat untuk dilakukan kerana penyelesaian PBS tidak menjejaskan sel secara berbahaya. Penyelesaian HBSS sebaliknya lebih disukai terus dari pasaran kerana ia berbahaya untuk menyediakannya di makmal memandangkan kelazatannya dan kemungkinan pencemaran daripada bakteria atau kulat. Selain itu, untuk mencapai keadaan yang menggalakkan memerlukan lebih banyak sumber kerana ia hanya boleh disimpan pada suhu rendah.
Walaupun tujuan asas kedua-dua larutan garam ini adalah sama, permintaan PBS telah meningkat sejak beberapa tahun kebelakangan ini kerana ia boleh digunakan sebagai medium pengangkutan virus untuk penyimpanan virus RNA termasuk Virus Corona.
